1，透析袋濃縮法

利用透析袋濃縮蛋白質(zhì)溶液是應(yīng)用最廣的一種。將要濃縮的蛋白溶液放入透析袋（無(wú)透析袋可用玻璃紙代替），結(jié)扎，把高分子（6000－12000）聚合物如聚乙二醇（碳蠟）、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。也可將吸水劑配成30%－40%濃度的溶液，將裝有蛋白液的透析袋放入即可。吸水劑用過(guò)后，可放入溫箱中烘干或自然干燥后，仍可再用。自貢濃縮蛋白設(shè)備

主要用于更換蛋白質(zhì)的緩沖液，有透析袋即可，不需要特殊的儀器。

2，冷凍干燥濃縮法

這是濃縮蛋白質(zhì)的一種較好的辦法，它既使蛋白質(zhì)不易變性，又保持蛋白質(zhì)中固有的成分。它是在冰凍狀態(tài)下直接升華去除水分。具體做法是將蛋白液在低溫下冰凍，然后移置干燥器內(nèi)（干燥器內(nèi)裝有干燥劑，如NaOH、CaCl2和硅膠等）。密閉，迅速抽空，并維持在抽空狀態(tài)。數(shù)小時(shí)后即可獲得含有蛋白的干燥粉末。干燥后的蛋白質(zhì)保存方便，應(yīng)用時(shí)可配成任意濃度使用。也可采用凍干機(jī)進(jìn)行冷凍干燥。

在冷凍狀態(tài)下讓揚(yáng)品種的液體升華。

3，吹干濃縮法

將蛋白溶液裝入透析袋內(nèi)，放在電風(fēng)扇下吹。此法簡(jiǎn)單，但速度慢，且溫度不能過(guò)高，更好不要超過(guò)15℃。

4，超濾膜濃縮法

此法是利用微孔纖維素膜通過(guò)高壓將水分濾出，而蛋白質(zhì)存留于膜上達(dá)到濃縮目的。有兩種方法進(jìn)行濃縮：一種是用醋酸纖維素膜裝入高壓過(guò)濾器內(nèi)，在不斷攪拌之下過(guò)濾；另一種是將蛋白液裝入透析袋內(nèi)置于真空干燥器的通風(fēng)口上，負(fù)壓抽氣，而使袋內(nèi)液體滲出。

主要針對(duì)小體積蛋白質(zhì)溶液（幾ml）此法更不易引起變性，不過(guò)得有濃縮器，不是哪個(gè)實(shí)驗(yàn)室都有的。

5，凝膠濃縮法

選用孔徑較小的凝膠，如SephadexG25或G50，將凝膠直接加入蛋白溶液中。根據(jù)干膠的吸水量和蛋白液需濃縮的倍數(shù)而稱取所需的干膠量。放入冰箱內(nèi)，凝膠粒子吸水后，通過(guò)離心除去。

6，濃縮膠濃縮法

濃縮膠是一種高分子網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的有機(jī)聚合物，具有很強(qiáng)的吸水性能。每克干膠可吸水120ml～150ml。它能吸收低分子量的物質(zhì)，如水、葡萄糖、蔗糖、無(wú)機(jī)鹽等，適宜濃縮10000分子量以上的生物大分子物質(zhì)。濃縮后，蛋白質(zhì)的回收率可達(dá)80%～90%。比凝膠應(yīng)用方便，直接加入被濃縮的溶液中即可。必須注意，濃縮溶液的pH值應(yīng)大于被濃縮物質(zhì)的等電點(diǎn)，否則在濃縮膠表面產(chǎn)生陽(yáng)離子交換，影響濃縮物質(zhì)的回收率。

7，丙酮沉淀法：

試驗(yàn)要求的儀器簡(jiǎn)單，但是常常導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性。

8，免疫沉淀法：

通過(guò)免疫沉淀法，用蛋白質(zhì)特異性能夠定量能夠分離目的蛋白。有三個(gè)步驟組成：首先將特異性抗體加入細(xì)胞提取物，第二步加入經(jīng)化學(xué)固定的金黃色葡萄球菌，以確保形成大量沉淀。這些細(xì)菌通過(guò)蛋白質(zhì)A和抗體形成復(fù)合物，蛋白質(zhì)A與免疫球蛋白的Fc部分有高度的親和性?；蛘哒f(shuō)，純化的蛋白A結(jié)合Sephrarose樹脂，為從細(xì)胞提取物中分離出抗原抗體復(fù)合物，提供一個(gè)固體基質(zhì)。最后通過(guò)洗脫，除去尚未沉淀的雜質(zhì)。

為了除去已破碎的或固定差的細(xì)胞，在用于免疫沉淀（作用）之前可以與纖細(xì)地金黃色葡萄球菌細(xì)胞，如果要用蛋白質(zhì)ASephrarose樹脂,參考廠家說(shuō)明書。

9，硫酸銨沉淀法：

利用高濃度鹽將蛋白質(zhì)析出（鹽析），選擇硫酸按是因?yàn)椋蝴}析有效性，pH范圍廣，溶解度高，溶液散熱少，經(jīng)濟(jì)。

10，(低溫)有機(jī)溶劑沉淀法：

強(qiáng)調(diào)低溫（0-4度以下）是因?yàn)?0度時(shí)蛋白會(huì)在有機(jī)溶劑中變性，可用乙醇，丙酮等。注意：Mg2++離子，pH值。

11，聚乙二醇（PEG）沉淀法：

PEG是一個(gè)水溶性非離子多聚體，使用PEG時(shí)旨在個(gè)別情況下才會(huì)是蛋白質(zhì)稍有變性！他溶解是散熱低，形成沉淀的平衡時(shí)間短，通常達(dá)到30%時(shí)蛋白質(zhì)就會(huì)達(dá)到更大量的沉淀。